搖瓶機培養方法在浸沒培養過程中振蕩的目的在于改善活細胞的氧氣和營養物的供給。培養通常以特定生長條件下的培養物接種,也可用孢子接種。在絕大多數情況下,接種量有一較佳濃度,此在開始之前,須通過預試加以確定。而在整個搖瓶發酵過程中保持相對無菌是成功地實施這項技術的必要保證。
搖瓶機培養的機械裝置主要由用于放置和固定燒瓶的平臺以及牽引其運轉的馬達和運轉系統組成,需安裝于有維持恒溫和恒濕自動調節能力的隔熱室內。
目前也有具備恒溫裝置的小型臺式搖床。
搖床的設計和使用性能主要從下列幾項入手:(1)所使用的設備,(2)平衡要求,(3)搖床的大小、型號,(4)培養條件及恒溫調控,(5)試管或小型發酵器的振蕩培養性能。
搖瓶機細菌培養試驗步驟:
1、復蘇:根據所培養的細菌選擇適宜的培養基,大部分細菌在LB培養基中在超凈工作臺先用1毫升左右的適宜的培養基溶解冷凍菌,然后轉移到10毫升中試管(放入4毫升液體培養基)中,一般在37攝氏度搖床靜止或低轉速培養12小時或者過夜(溫度取決于所培養的細菌適宜生長的溫度)。
2、平板劃線培養:在平板(瓊脂+液體培養基)劃線,放37攝氏度培養箱培養箱中倒置培養6小時~12小時,在平板上觀察是否形成了單菌落.
3、挑單菌落:在超凈臺中挑選典型單菌落,置入10毫升中試管(內有5毫升液體培養基)中,在37攝氏度搖床,轉速200轉培養12小時或者過夜,肉眼能看到試管渾濁。
4、按照1:20的比例將中試管中的菌液移到250毫升三角瓶,培養條件同前。